血清藥物濃度檢測是臨床治療藥物監(jiān)測（TDM）的核心環(huán)節(jié)，通過精準(zhǔn)測定患者血液中藥物濃度，可優(yōu)化給藥方案、減少不良反應(yīng)。本文結(jié)合高效液相色譜法（HPLC）、熒光偏振免疫法（FPIA）等主流技術(shù)，系統(tǒng)闡述血清藥物濃度檢測儀的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。 一、操作前準(zhǔn)備：環(huán)境與設(shè)備雙重保障
1.環(huán)境條件控制
實驗室需保持恒溫（20-25℃）、恒濕（40-60%），避免電磁干擾及強光直射。操作臺面需定期清潔消毒，防止交叉污染。
2.設(shè)備與試劑檢查
儀器狀態(tài)：開機前檢查電源線、氣源連接是否穩(wěn)固，避免使用延長線或適配器。例如，HPLC系統(tǒng)需確認(rèn)流動相瓶密封性，防止漏液。
試劑與耗材：核對試劑批號、有效期及儲存條件。如丙戊酸鈉檢測需使用雅培公司專用試劑盒，定標(biāo)液需冷藏保存，使用前復(fù)溶至規(guī)定濃度。
校準(zhǔn)品與質(zhì)控品：每日檢測前運行標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)，使用雙水平質(zhì)控血清（低值、高值）驗證儀器精密度。
二、樣本采集與處理：細(xì)節(jié)決定成敗
1.樣本采集規(guī)范
采血時間：根據(jù)藥物代謝動力學(xué)特性選擇采血時機。例如，穩(wěn)態(tài)濃度檢測需在連續(xù)給藥5個半衰期后，于下次服藥前采集谷濃度樣本；毒性評估可隨時采血。
采血技術(shù)：使用真空抗凝管（如EDTA管）采集靜脈血2-3ml，避免溶血或凝血。
2.樣本前處理
離心分離：3000rpm離心10分鐘，分離血清或血漿。例如，環(huán)孢素全血檢測需加入溶解劑與沉淀劑，10900rpm高速離心5分鐘以獲取上清液。
蛋白沉淀：加入乙酸乙酯進(jìn)行渦旋混勻，去除蛋白質(zhì)干擾。
萃取凈化：加入萃取液（如乙酸乙酯/四硼酸鈉混合液）渦旋10秒，14000rpm離心3分鐘，取上層有機相過濾后進(jìn)樣。
三、儀器操作：從校準(zhǔn)到檢測的全流程
1.系統(tǒng)校準(zhǔn)與質(zhì)控
日常校準(zhǔn)：每日開機后運行一點校準(zhǔn)，更換試劑或傳感器后執(zhí)行兩點校準(zhǔn)。例如，Dimension系列生化分析儀每2小時自動校準(zhǔn)一次。
質(zhì)控分析：將低值、高值質(zhì)控血清加入樣本杯，按“Run”鍵啟動檢測。結(jié)果需符合L-J質(zhì)控圖3s控制限，異常時排查原因并復(fù)測。
2.樣本檢測
進(jìn)樣設(shè)置：HPLC系統(tǒng)設(shè)置進(jìn)樣量（如20μl）、流速（1ml/min）及檢測波長。熒光偏振免疫分析儀（FPIA）則需加載定標(biāo)曲線文件。
自動化檢測：將處理后的樣本加入進(jìn)樣器，啟動批處理程序。例如，TDxFlx儀器自動完成血清萃取、熒光標(biāo)記及信號轉(zhuǎn)換，10分鐘內(nèi)輸出結(jié)果。
3.結(jié)果審核與報告
數(shù)據(jù)解析：將樣本峰面積或熒光信號代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算藥物濃度。
異常處理：對超出線性范圍或質(zhì)控失控的結(jié)果，需復(fù)測或稀釋樣本重新分析。
四、維護(hù)與質(zhì)控：保障長期穩(wěn)定性
1.日常維護(hù)
清潔消毒：每日檢測后用75%乙醇擦拭儀器表面，更換廢液瓶及反應(yīng)杯。
部件檢查：每周檢查移液器、進(jìn)樣針是否堵塞，每月校準(zhǔn)加樣臂精度。
2.定期保養(yǎng)
深度清潔：每季度拆卸流動池，超聲波清洗以去除蛋白沉積。
性能驗證：每年參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評，確保檢測結(jié)果與全國平均值偏差<10%。
五、安全與合規(guī)：規(guī)范操作底線
生物安全：處理血液樣本時佩戴手套、口罩，廢棄物按醫(yī)療垃圾處理。
數(shù)據(jù)管理：檢測結(jié)果需雙人核對，電子報告加密存儲，紙質(zhì)報告保存≥5年。
